Методы анализа пищевых продуктов определение компонентов и пищевых добавок
ENG
О портале
Реклама в журнале
Реклама на портале
Архив номеров
Свежий номер
Подписка
О журнале
Подробнее
Адрес редакции: 105066, Москва, Токмаков пер., д. 16, стр. 2, пом. 2, комн. 5
Редакция:
Телефон: +7 (499) 267-40-10
E-mail: nvy@vedomost.ru
Отдел подписки:
Прямая линия:
8 (800) 200-11-12
бесплатный звонок из любого региона России
E-mail: podpiska@vedomost.ru
Отдел рекламы:
Прямая линия:
+7 (499) 267-40-10, +7 (499) 267-40-10
E-mail: reklama@vedomost.ru
Вопросы работы портала:
E-mail: support@meatbranch.com
| Зарегистрированных посетителей: 9532 Сообщений: 1 Сообщений: 1 Сообщений: 12 Сообщений: 1 Сообщений: 1
АМИТЕКС – семислойная колбасная оболочка, производимая компанией «Атлантис-Пак» Жирные кислоты, соли алюминия, кальция, натрия, калия и аммония Эфиры и глицериды кислот Жёлтый прочный AB (жёлтый кислотный G) |
АМИТЕКС
Ìåòîä èäåíòèôèêàöèè ãåíåòè÷åñêè ìîäèôèöèðîâàííûõ èñòî÷íèêîâ ðàñòèòåëüíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ ñ èñïîëüçîâàíèåì áèîëîãè÷åñêîãî ìèêðî÷èïà. Ñóùíîñòü ðåôðàêòîìåòðèè, ãðàâèìåòðè÷åñêîãî, êîëîðèìåòðè÷åñêîãî, àòîìíî-àáñîðáöèîííîãî ìåòîäîâ. Òîíêîñëîéíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ.
Îòïðàâèòü ñâîþ õîðîøóþ ðàáîòó â áàçó çíàíèé ïðîñòî. Èñïîëüçóéòå ôîðìó, ðàñïîëîæåííóþ íèæå
Ñòóäåíòû, àñïèðàíòû, ìîëîäûå ó÷åíûå, èñïîëüçóþùèå áàçó çíàíèé â ñâîåé ó÷åáå è ðàáîòå, áóäóò âàì î÷åíü áëàãîäàðíû.
Ðàçìåùåíî íà https://www.allbest.ru/
ÐÎÑÎÁÐÀÇÎÂÀÍÈÅ
Ãîñóäàðñòâåííîå îáðàçîâàòåëüíîå ó÷ðåæäåíèå âûñøåãî ïðîôåññèîíàëüíîãî îáðàçîâàíèÿ
«ÏÅÍÇÅÍÑÊÀß ÃÎÑÓÄÀÐÑÒÂÅÍÍÀß ÒÅÕÍÎËÎÃÈ×ÅÑÊÀß ÀÊÀÄÅÌÈß» (ÏÃÒÀ)
Ôàêóëüòåò: çàî÷íîãî îáðàçîâàíèÿ
Êàôåäðà: ÁÒÁ
Ìåòîäû àíàëèçà è êîíòðîëÿ êà÷åñòâà ïèùåâûõ äîáàâîê
Êîíòðîëüíàÿ ðàáîòà ¹2
Âàðèàíò ¹3
Âûïîëíèëà ñòóäåíòêà ãðóïïû 07ÁÒ1ç
Äàÿíîâà (Ãàâðèíà) Å.Â.
Ïðîâåðèë:
Ìàðûíîâà Ì.À.
Ïåíçà 2011
Ñîäåðæàíèå
- Ââåäåíèå
- 1. Ìåòîä èäåíòèôèêàöèè ãåíåòè÷åñêè ìîäèôèöèðîâàííûõ èñòî÷íèêîâ ðàñòèòåëüíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ ñ èñïîëüçîâàíèåì áèîëîãè÷åñêîãî ìèêðî÷èïà
- 2. Ðåôðàêòîìåòðèÿ
- 3. Ãðàâèìåòðè÷åñêèé ìåòîä
- 4. Êîëîðèìåòðè÷åñêèé
- 5. Àòîìíî-àáñîðáöèîííûé ìåòîä
- 6. Òîíêîñëîéíàÿ õðîìàòîãðàôèÿ
- 7. Òèòðèìåòðè÷åñêèé àíàëèç
- 8. Èíâåðñèîííî-âîëüòàìïåðîìåòðè÷åñêèé
- Ñïèñîê èñïîëüçîâàííîé ëèòåðàòóðû
Ïîêàçàòåëü | Íîðìàòèâíûé äîêóìåíòíà óñòàíîâëåííûé ïîêàçàòåëü | Íîðìàòèâíûé äîêóìåíò íà ìåòîä àíàëèçà | Ìåòîä àíàëèçà |
ñòðóêòóðà | ÃÎÑÒ Ð 52821-2007 | ÃÎÑÒ 5897 | |
Ìàññîâàÿ äîëÿ îáùåãî îáåçæèðåííîãî îñòàòêà êàêàî | ÃÎÑÒ Ð 52821-2007 | ÃÎÑÒ Ð 53156 | òèòðîâàíèå |
Çàðàæåííîñòü âðåäèòåëÿìè | ÃÎÑÒ Ð 52821-2007 | ÃÎÑÒ 13586.6 | Ïîñåâ íà ñðåäå |
Îáùàÿ ñõåìà àíàëèçà ïðîá ìåòîäîì ÈÂ ïðåäñòàâëåíà íà ðèñóíêå 4.
Ðèñóíîê 4 — Îñíîâíûå ýòàïû àíàëèçà ïðîá ìåòîäîì ÈÂ
Ìåòîä È èçìåðåíèé îñíîâàí íà ñïîñîáíîñòè ýëåìåíòà ýëåêòðîõèìè÷åñêè îñàæäàòüñÿ íà èíäèêàòîðíîì ýëåêòðîäå èç àíàëèçèðóåìîãî ðàñòâîðà ïðè çàäàííîì ïîòåíöèàëå ïðåäåëüíîãî äèôôóçèîííîãî òîêà, à çàòåì ðàñòâîðÿòüñÿ â ïðîöåññå àíîäíîé ïîëÿðèçàöèè ïðè îïðåäåëåííîì ïîòåíöèàëå, õàðàêòåðíîì äëÿ äàííîãî ýëåìåíòà. Ðåãèñòðèðóåìûé íà âîëüòàìïåðîãðàììå àíàëèòè÷åñêèé ñèãíàë ýëåìåíòà ïðîïîðöèîíàëåí åãî êîíöåíòðàöèè.
 ýëåêòðîõèìè÷åñêîé ÿ÷åéêå ìûøüÿê èç ïîäãîòîâëåííîé ïðîáû ðàñòâîðà ìûøüÿêà (3+) íàêàïëèâàþò â âèäå ìûøüÿêà (0) íà ÇÃÝ èëè ÇÝ â ðàñòâîðå ôîíîâîãî ýëåêòðîëèòà 0,02-0,1 ìîëü/äì òðèëîíà Á ïî ÃÎÑÒ 10652 â òå÷åíèå çàäàííîãî âðåìåíè ýëåêòðîëèçà 0,5-15 ìèí ïðè ïîòåíöèàëå ýëåêòðîëèçà, ðàâíîì ìèíóñ 1,0  îòí. ÕÑÝ. Ïðîöåññ ýëåêòðîðàñòâîðåíèÿ ìûøüÿêà (0) ñ ïîâåðõíîñòè ýëåêòðîäà ïðîâîäÿò ïðè ëèíåéíîì èëè äèôôåðåíöèàëüíî-èìïóëüñíîì ðåæèìå èçìåíåíèÿ ïîòåíöèàëà â ïîëîæèòåëüíóþ ñòîðîíó äî ïîòåíöèàëà ðàñòâîðåíèÿ çîëîòà. Ïîòåíöèàë àíîäíîãî ïèêà ìûøüÿêà íàõîäèòñÿ â èíòåðâàëå îò +0,01 äî +0,05 ïðè ðÍ ðàñòâîðà 3-4.
Ìàññîâóþ êîíöåíòðàöèþ ýëåìåíòà â èñïûòóåìûõ ðàñòâîðàõ ïðîáû îïðåäåëÿþò ïî ìåòîäó äîáàâîê â íèõ ÃÐ ñ óñòàíîâëåííûì ñîäåðæàíèåì îïðåäåëÿåìîãî ýëåìåíòà.
Ïîäîáíûå äîêóìåíòû
Ñîçäàíèå ãåíåòè÷åñêè ìîäèôèöèðîâàííûõ îðãàíèçìîâ (ÃÌÎ) äëÿ ïðîèçâîäñòâà ïðîäóêòîâ ðàñòèòåëüíîãî è æèâîòíîãî ïðîèñõîæäåíèÿ ïóòåì èçìåíåíèÿ ãåííûõ õàðàêòåðèñòèê ëàáîðàòîðíûì ïóòåì. Âðåä è ïîëüçà ïðîäóêòîâ ïèòàíèÿ ñ ÃÌÎ. Ñïèñîê êîìïàíèé, èñïîëüçóþùèõ ÃÌÎ.
ðåôåðàò [16,2 K], äîáàâëåí 11.01.2012
Ïèùåâûå äîáàâêè â íàøåé æèçíè. Ïîíÿòèå ïèùåâûõ äîáàâîê â ìÿñîïåðåðàáîòêå. Ðàñ÷åò íàòóðàëüíûõ ïîëóôàáðèêàòîâ è äîëè ïèùåâûõ äîáàâîê. Òåõíîëîãè÷åñêèå ñâîéñòâà ðÿäà ïèùåâûõ äîáàâîê. Ïîèñê íîâûõ òåõíîëîãè÷åñêèõ ðåøåíèé ïî èñïîëüçîâàíèþ ïèùåâûõ èíãðåäèåíòîâ.
ðåôåðàò [23,9 K], äîáàâëåí 27.05.2009
Êëàññèôèêàöèÿ è ïðàâèëà ìàðêèðîâêè ïðîäîâîëüñòâåííûõ òîâàðîâ. Àññîðòèìåíò ïèùåâûõ äîáàâîê. Ìóòàãåííûå è àëëåðãè÷åñêèå ñâîéñòâà ïèùåâûõ äîáàâîê. Âîçìîæíûå âðåäíûå âîçäåéñòâèÿ îò ïðèìåíåíèÿ ïèùåâûõ äîáàâîê. Ðàäèîëîãè÷åñêèå òðåáîâàíèÿ áåçîïàñíîñòè.
êóðñîâàÿ ðàáîòà [1,7 M], äîáàâëåí 15.06.2010
Êëàññèôèêàöèÿ ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ è äîáàâîê. Ýòàïû êîíòðîëÿ ïðîäóêòîâ ïèòàíèÿ: îòáîð ïðîáû, ïðèãîòîâëåíèå ñìåñè, âûäåëåíèå öåëåâîãî êîìïîíåíòà, àíàëèç. Ìåòîäû àíàëèçà ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ: òèòðèìåòðè÷åñêèå, îïòè÷åñêèå, ýëåêòðîõèìè÷åñêèå è õðîìàòîìåòðè÷åñêèå.
êóðñîâàÿ ðàáîòà [60,0 K], äîáàâëåí 21.12.2014
Ìåòðîëîãè÷åñêèå îñíîâû êîíòðîëÿ êà÷åñòâà èññëåäîâàòåëüñêèõ ðàáîò. Õàðàêòåðèñòèêè ìåòîäîâ è ìåòîäèê. Âîëüòàìïåðìåòðè÷åñêèå ìåòîäû àíàëèçà ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ. Òåïëîåìêîñòü òåñòà ïðè çíà÷åíèè åãî âëàæíîñòè 39,81%. Òèòðèìåòðè÷åñêèé ìåòîä îïðåäåëåíèÿ êðàõìàëà.
êîíòðîëüíàÿ ðàáîòà [205,1 K], äîáàâëåí 17.02.2011
Ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ ïèùåâûõ äîáàâîê. Ïîíÿòèå, âèäû ïèùåâûõ äîáàâîê, èõ ñîäåðæàíèå, öåëè äîáàâëåíèÿ â ïèùåâûå ïðîäóêòû. Ñèñòåìà öèôðîâîé êîäèôèêàöèè, îñîáî âðåäíûå è çàïðåùåííûå ïèùåâûå äîáàâêè. Íåîáõîäèìîñòü â èñïîëüçîâàíèè íàòóðàëüíûõ ïðîäóêòîâ ïèòàíèÿ.
ïðåçåíòàöèÿ [3,7 M], äîáàâëåí 04.05.2011
Õàðàêòåðèñòèêà ñïåêòðà âåùåñòâ, äîáàâëÿåìûõ â ïèùåâûå ïðîäóêòû. Èçó÷åíèå îñîáåííîñòåé ïîëó÷åíèÿ è èñïîëüçîâàíèÿ ïèùåâûõ äîáàâîê, êðàñèòåëåé, óñèëèòåëåé âêóñà, àðîìàòèçàòîðîâ è êîíñåðâàíòîâ. Èññëåäîâàíèå ñïèñêà ðàçðåøåííûõ è çàïðåùåííûõ ïèùåâûõ äîáàâîê.
ðåôåðàò [25,6 K], äîáàâëåí 12.03.2013
Ïîíÿòèå ïèùåâûõ äîáàâîê êàê âåùåñòâ, äîáàâëÿåìûõ â ïðîäóêòû ïèòàíèÿ äëÿ óëó÷øåíèÿ èõ âíåøíèõ êà÷åñòâ, âêóñà è óâåëè÷åíèÿ ñðîêà õðàíåíèÿ. Êëàññèôèêàöèÿ ïèùåâûõ äîáàâîê, õàðàêòåðèñòèêà èõ ñâîéñòâ. Îòðèöàòåëüíîå âëèÿíèå ïèùåâûõ äîáàâîê íà çäîðîâüå ÷åëîâåêà.
ðåôåðàò [36,5 K], äîáàâëåí 21.03.2015
Èíäåêñàöèÿ ïèùåâûõ äîáàâîê, êëàññèôèêàöèÿ, òåõíîëîãè÷åñêèå ôóíêöèè. Èñïîëüçîâàíèå ôåðìåíòíûõ ïðåïàðàòîâ â ìÿñíîé ïðîìûøëåííîñòè. Ïåêòèí è åãî ïðèìåíåíèå. Ñîâðåìåííûå îòäåëî÷íûå ïîëóôàáðèêàòû äëÿ êîíäèòåðñêèõ èçäåëèé ñ èñïîëüçîâàíèåì ïèùåâûõ äîáàâîê.
êîíòðîëüíàÿ ðàáîòà [30,7 K], äîáàâëåí 18.10.2010
Ôèçè÷åñêèå ñâîéñòâà âåùåñòâ, èõ èñïîëüçîâàíèå äëÿ ïðèìåíåíèÿ òåðìîàíàëèòè÷åñêèõ ìåòîäîâ îïðåäåëåíèÿ êà÷åñòâà ïðîäóêöèè. Äèôôåðåíöèàëüíî-òåðìè÷åñêèé àíàëèç; êëàññèôèêàöèÿ ìåòîäîâ õðîìàòîãðàôèè, ïîêàçàòåëè õàðàêòåðèçóþùèå ìåõàíè÷åñêèå ñâîéñòâà òîâàðîâ.
êîíòðîëüíàÿ ðàáîòà [1,5 M], äîáàâëåí 15.11.2010
- ãëàâíàÿ
- ðóáðèêè
- ïî àëôàâèòó
- âåðíóòüñÿ â íà÷àëî ñòðàíèöû
- âåðíóòüñÿ ê íà÷àëó òåêñòà
- âåðíóòüñÿ ê ïîäîáíûì ðàáîòàì
Îïðåäåëÿåìûé êîìïîíåíò â ôåðìåíòàòèâíûõ ìåòîäàõ àíàëèçà, åãî ñîäåðæàíèå. Ïðèìåíåíèå ôåðìåíòàòèâíûõ ìåòîäîâ â íàó÷íûõ èññëåäîâàíèÿõ, ïðè ðàçðàáîòêå íîâûõ ïèùåâûõ òåõíîëîãèé è áèîòåõíîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ. Ýòàïû îïðåäåëåíèÿ ïåðâè÷íîé ñòðóêòóðû áåëêîâ.
Ñòóäåíòû, àñïèðàíòû, ìîëîäûå ó÷åíûå, èñïîëüçóþùèå áàçó çíàíèé â ñâîåé ó÷åáå è ðàáîòå, áóäóò âàì î÷åíü áëàãîäàðíû.
Ðàçìåùåíî íà https://www.allbest.ru/
ÌÈÍÈÑÒÅÐÑÒÂÎ ÑÅËÜÑÊÎÃÎ ÕÎÇßÉÑÒÂÀ È ÏÐÎÄÎÂÎËÜÑÒÂÈß ÐÁ
Ó×ÐÅÆÄÅÍÈÅ ÎÁÐÀÇÎÂÀÍÈß «ÃÐÎÄÍÅÍÑÊÈÉ ÃÎÑÓÄÀÐÑÒÂÅÍÍÛÉ ÀÃÐÀÐÍÛÉ ÓÍÈÂÅÐÑÈÒÅÒ»
Ñïåöèàëüíîñòü Òåõíîëîãèÿ õðàíåíèÿ è ïåðåðàáîòêè æèâîòíîãî ñûðüÿ
ÐÅÔÅÐÀÒ
íà òåìó: «Ôåðìåíòàòèâíûå ìåòîäû àíàëèçà ïèùåâûõ ïðîäóêòîâ»
Âûïîëíèëà: Êóçüìèöêàÿ Äàðüÿ
ÃÐÎÄÍÎ 2014
Ñîäåðæàíèå
- Ââåäåíèå
- Èñïîëüçîâàíèå ôåðìåíòàòèâíûõ ìåòîäîâ àíàëèçà
- Ñïèñîê èñïîëüçóåìîé ëèòåðàòóðû
Ââåäåíèå
Ôåðìåíòàòèâíûå ìåòîäû àíàëèçà, îñíîâàíû íà èñïîëüçîâàíèè õèìè÷åñêèõ ðåàêöèé ñ ó÷àñòèåì ôåðìåíòîâ. Î ñîäåðæàíèè îïðåäåëÿåìîãî êîìïîíåíòà ñóäÿò ëèáî ïî êîë-âó êîíå÷íîãî ïðîäóêòà ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè, ëèáî, ÷àùå, ïî íà÷àëüíîé ñêîðîñòè ïðîöåññà, ïîëîæåííîãî â îñíîâó ìåòîäèêè îïðåäåëåíèÿ (ñì. Êèíåòè÷åñêèå ìåòîäû àíàëèçà). Äëÿ íàáëþäåíèÿ çà ñêîðîñòüþ ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè ïðèìåíÿþò îáû÷íî èíñòðóìåíòàëüíûå ìåòîäû, ÷àùå äðóãèõ — ëþìèíåñöåíòíûå, ñïåêòðîôîòîìåòðè÷åñêèå, ýëåêòðîõèìè÷åñêèå. Äîñòîèíñòâà ôåðìåíòàòèâíûõ ìåòîäîâ àíàëèçà: âûñîêàÿ ÷óâñòâèòåëüíîñòü, îáóñëîâëåííàÿ àêòèâíîñòüþ ôåðìåíòîâ, ïðèðîäîé èíäèêàòîðíûõ ðåàêöèé (ñ ïîìîùüþ êîòîðûõ îïðåäåëÿþò â-âî) è ñïîñîáàìè äåòåêöèè àíàëèòè÷åñêîãî ñèãíàëà; âûñîêàÿ ñåëåêòèâíîñòü è ìÿãêèå óñëîâèÿ ïðîâåäåíèÿ àíàëèçà.
Îïðåäåëÿåìûì êîìïîíåíòîì â ôåðìåíòàòèâíûõ ìåòîäàõ àíàëèçà ìîãóò áûòü ñóáñòðàòû (âåùåñòâà, ïðåâðàùåíèå êîòîðûõ êàòàëèçèðóåò ôåðìåíò), ñàìè ôåðìåíòû, êîôåðìåíòû (âåùåñòâà, íåîáõîäèìûå äëÿ îñóùåñòâëåíèÿ êàòàëèòè÷åñêîãî äåéñòâèÿ ôåðìåíòà) è ýôôåêòîðû (èçìåíÿþùèå êàòàëèòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü ôåðìåíòà — àêòèâàòîðû, èíãèáèòîðû). Ñðåäè êîôåðìåíòîâ — ÍÀÄ è ÍÀÄÍ (ñîîòâ. íèêîòèíàìèäàäåíèíäèíóêëåîòèä è åãî âîññòàíîâëåííàÿ ôîðìà), ÍÀÄÔ è ÍÀÄÔÍ (ñîîòâ. íèêîòèíàìèäàäåíèíäè-íóêëåîòèäôîñôàò è åãî âîññòàíîâëåííàÿ ôîðìà), ÀÒÔ (àäå-íîçèíòðèôîñôàò).
ôåðìåíòàòèâíûé ïèùåâîé ïðîäóêò áèîòåõíîëîãè÷åñêèé
Èñïîëüçîâàíèå ôåðìåíòàòèâíûõ ìåòîäîâ àíàëèçà
Îñíîâíûìè ïðåèìóùåñòâàìè ïðèìåíåíèÿ ôåðìåíòàòèâíûõ ìåòîäîâ â íàó÷íûõ èññëåäîâàíèÿõ, ïðè ðàçðàáîòêå íîâûõ ïèùåâûõ òåõíîëîãèé è áèîòåõíîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ, à òàêæå ïðè àíàëèçå êà÷åñòâà, èäåíòèôèêàöèè è óñòàíîâëåíèÿ ôàëüñèôèêàöèè ïðîäóêòîâ ïèòàíèÿ è ïèùåâîãî ñûðüÿ ÿâëÿþòñÿ:
1. Âûñîêàÿ ñïåöèôè÷íîñòü è äîñòîâåðíîñòü ðåçóëüòàòîâ. Âûñîêîñïåöèôè÷íûå ôåðìåíòàòèâíûå ìåòîäû àíàëèçà äàþò, êàê ïðàâèëî, áîëåå äîñòîâåðíûå ðåçóëüòàòû, ÷åì íåñïåöèôè÷åñêèå õèìè÷åñêèå ìåòîäû. Ñïåöèôè÷íîñòü äåéñòâèÿ ôåðìåíòîâ, îñíîâàííàÿ íà êîìïëåìåíòàðíîå ïðîñòðàíñòâåííîé êîíôèãóðàöèè àêòèâíîãî öåíòðà è ñóáñòðàòà ÿâëÿåòñÿ ãàðàíòîì äîñòîâåðíîñòè è íàäåæíîñòè ôåðìåíòàòèâíîãî ìåòîäà ïðè èññëåäîâàíèè îòäåëüíûõ ñîåäèíåíèé â ìíîãîêîìïîíåíòíûõ ñìåñÿõ, èìåþùèõ ñëîæíûé ñîñòàâ è ñòðîåíèå, òàêèõ, êàêèìè è ÿâëÿþòñÿ ïèùåâûå ïðîäóêòû. Ïðè ðàçðàáîòêå ôåðìåíòàòèâíûõ ìåòîäîâ è ïîäáîðå ðåàãåíòîâ, â ïåðâóþ î÷åðåäü, âûáèðàþò ôåðìåíòû ñ íàèáîëüøåé ñïåöèôè÷íîñòüþ äåéñòâèÿ, äëÿ êîòîðûõ ïîäáèðàþòñÿ îïòèìàëüíûå óñëîâèÿ ïðîâåäåíèÿ àíàëèçà. Êðîìå òîãî, ïðè ðàçðàáîòêå ìåòîäîâ ôåðìåíòàòèâíîãî àíàëèçà îòäåëüíûõ êîìïîíåíòîâ ïðîäóêòîâ ïèòàíèÿ îáû÷íî èñïîëüçóþò íåñêîëüêî ôåðìåíòîâ, êîòîðûå ïîñëåäîâàòåëüíî ôóíêöèîíèðóþò â äàííîé ñèñòåìå.
2. Ïðîñòûå ñïîñîáû ïîäãîòîâêè ïðîá, êîòîðûå èñêëþ÷àþò ïîòåðþ èññëåäóåìûõ êîìïîíåíòîâ. Îñíîâíàÿ çàäà÷à, êîòîðóþ íåîáõîäèìî âûïîëíèòü ïðè ïîäãîòîâêå ïðîáû, — ïî âîçìîæíîñòè íàèáîëåå ïîëíî ñîõðàíèòü äëÿ àíàëèçà èññëåäóåìûé êîìïîíåíò áåç åãî êîëè÷åñòâåííîé ïîòåðè èëè èçìåíåíèÿ ñòðóêòóðû.  íåêîòîðûõ ñëó÷àÿõ âîçìîæåí ïðÿìîé àíàëèç ïðîáû áåç åå ïðåäâàðèòåëüíîé ïîäãîòîâêè (íàïðèìåð, ïðè àáñîëþòíîé ñïåöèôè÷íîñòè ôåðìåíòà ê èññëåäóåìîìó âåùåñòâó è îòñóòñòâèè â ïðîáå êàêèõ-ëèáî ìåøàþùèõ ôàêòîðîâ). Îáû÷íî æå äëÿ ôåðìåíòàòèâíîãî àíàëèçà èñïîëüçóþòñÿ ïðîñòûå è õîðîøî èçâåñòíûå ñïîñîáû ïîäãîòîâêè ïðîá, òàêèå êàê: ðàçáàâëåíèå, ôèëüòðàöèÿ (öåíòðèôóãèðîâàíèå), íåéòðàëèçàöèÿ (ïîäêèñëåíèå), ýêñòðàêöèÿ, îáåçæèðèâàíèå, îñâåòëåíèå, îáåñöâå÷èâàíèå. Òîëüêî â îïðåäåëåííûõ ñëó÷àÿõ ïðèìåíÿþò ñïåöèàëüíûå ñïîñîáû ïîäãîòîâêè ïðîá, íàïðèìåð, ïðè îïðåäåëåíèè âîäîíåðàñòâîðèìûõ ñîåäèíåíèé (õîëåñòåðèí, ëåöèòèí, êðàõìàë), íåñòàáèëüíîé L-àñêîðáèíîâîé êèñëîòû â òâåðäûõ ìàòåðèàëàõ è äð.
3. Ïðîñòàÿ è áûñòðàÿ ïðîöåäóðà èçìåðåíèé, êîòîðàÿ èñêëþ÷àåò èñïîëüçîâàíèå äîðîãîñòîÿùåãî îáîðóäîâàíèÿ.  áîëüøèíñòâå ôåðìåíòàòèâíûõ îïðåäåëåíèé èñïîëüçóþò ôîòîìåòðè÷åñêèå ñïîñîáû èçìåðåíèÿ ðåçóëüòàòîâ. Äëÿ ýòîãî âñå êîìïîíåíòû èñêóññòâåííîé òåñòîâîé ñèñòåìû, íàïðèìåð, áóôåð, êîôåðìåíòû, àêòèâàòîðû, âñïîìîãàòåëüíûå ôåðìåíòû è ïðîáó ñìåøèâàþò â ôîòîìåòðè÷åñêîé êþâåòå. Ïîñëå èçìåðåíèÿ íà÷àëüíîé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè äîáàâëÿþò ñòàðòîâûé ôåðìåíò, êîòîðûé èíèöèèðóåò ðåàêöèþ.  êîíöå ðåàêöèè (÷åðåç îïðåäåëåííûé ïðîìåæóòîê âðåìåíè) ïîâòîðíî èçìåðÿþò îïòè÷åñêóþ ïëîòíîñòü òåñòîâîé ñèñòåìû. Èç ðàçíèöû îïòè÷åñêèõ ïëîòíîñòåé â íà÷àëå è â êîíöå ðåàêöèè ïî óðàâíåíèþ çàêîíà Ëàìáåðòà — Áåðà ðàññ÷èòûâàþò êîíöåíòðàöèþ Ñ (ã/ë) èñêîìîãî ñîåäèíåíèÿ.
C = [(E 2 — E 1) îïûò — (E 2 — E 1) êîíòðîëü]VMF
å?d?v?10000
ãäå (E 2 — E 1) îïûò — ðàçíèöà êîíå÷íîé è íà÷àëüíîé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè â êþâåòå ñ ïðîáîé; (E 2 — E 1) êîíòðîëü— ðàçíèöà êîíå÷íîé è íà÷àëüíîé îïòè÷åñêîé ïëîòíîñòè â êþâåòå áåç ïðîáû; V — îáùèé îáúåì ðåàêöèîííîé ñìåñè, ìë; Ì — ìîëÿðíàÿ ìàññà èñêîìîãî ñîåäèíåíèÿ, ã/ìîëü; F — ôàêòîð ðàçâåäåíèÿ ïðîáû; å — ìîëÿðíûé êîýôôèöèåíò ýêñòèíêöèè (íàïðèìåð, êîôåðìåíòà ÍÀÄÔ/ÍÀÄ ïðè ë = 340 íì, å = 6,3 ë/ììîëü ñì); d — òîëùèíà êþâåòû, ñì; v — îáúåì ïðîáû, äîáàâëÿåìûé â êþâåòó, ìë.
 áîëüøèíñòâå ôåðìåíòàòèâíûõ ìåòîäîâ ïðÿìîìó ôîòîìåòðè÷åñêîìó êîíòðîëþ äîñòóïíî èçìåðåíèå òàêèõ âñïîìîãàòåëüíûõ êîìïîíåíòîâ òåñòîâîé ñèñòåìû, êàê êîôåðìåíòîâ ÍÀÄ+/ÏÀÄÍ èëè ÍÀÄÔ+/ÍÀÄÔÍ. Êîëè÷åñòâî âîññòàíîâëåííûõ èëè îêèñëåííûõ êîôåðìåíòîâ ïðÿìîïðîïîðöèîíàëüíî êîëè÷åñòâó èñêîìîãî ñîåäèíåíèÿ. Ñèñòåìà êîíå÷íûõ çíà÷åíèé ñ ôîòîìåòðè÷åñêèì èçìåðåíèåì ðåçóëüòàòà íàñòîëüêî íàäåæíà, ÷òî ñëóæèò â êà÷åñòâå ñòàíäàðòà äëÿ îöåíêè äðóãèõ ìåòîäèê. Äëÿ ïðîâåäåíèÿ ôåðìåíòàòèâíîãî àíàëèçà èñïîëüçóåòñÿ ñòàíäàðòíîå îáîðóäîâàíèå, êîòîðîå èìååòñÿ ïðàêòè÷åñêè â ëþáîé ïðîèçâîäñòâåííîé ëàáîðàòîðèè: ñïåêòðîôîòîìåòðû èëè ôîòîìåòðû ñ èíòåðâàëîì èçìåðåíèé îò 325 äî 800 íì; êþâåòû äëÿ ôîòîìåòðè÷åñêèõ èçìåðåíèé, ìåðíûå ïèïåòêè è äîçàòîðû, âåñû, öåíòðèôóãà, ðÍ-ìåòð, âîäÿíîé òåðìîñòàò, ôèëüòðû è ò. ï.
4. Âûñîêàÿ ÷óâñòâèòåëüíîñòü ìåòîäà è õîðîøàÿ âîñïðîèçâîäèìîñòü ðåçóëüòàòîâ. Âûñîêàÿ ÷óâñòâèòåëüíîñòü ïîçâîëÿåò èñïîëüçîâàòü ôåðìåíòàòèâíûå ìåòîäû äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñëåäîâûõ êîëè÷åñòâ âåùåñòâ. Íàïðèìåð, â ïðîäóêòàõ ïèòàíèÿ ìîãóò áûòü îïðåäåëåíû ñëåäóþùèå êîíöåíòðàöèè êîìïîíåíòîâ (ã/ë): ýòàíîë — 0,001; àöåòîàëüäåãèä — 0,001; ëèìîííàÿ êèñëîòà — 0,002; ãëèöåðèí — 0,001; D-ãëþêîçà — 0,002; D-ñîðáèò — 0,001; ëàêòîçà — 0,005; íèòðàòû — 0,001.
Êðîìå âûøåïåðå÷èñëåííûõ äîñòîèíñòâ ôåðìåíòàòèâíûõ ìåòîäîâ àíàëèçà ìîæíî íàçâàòü è óíèâåðñàëüíîñòü ïðèìåíåíèÿ, âûñîêóþ íàäåæíîñòü è óñòîé÷èâîñòü ê ìåøàþùèì ôàêòîðàì, íèçêèå çàòðàòû íà ïðîâåäåíèå àíàëèçà (âðåìÿ, îáîðóäîâàíèå, ðàñõîäóåìûå ìàòåðèàëû), à òàêæå èñïîëüçîâàíèå áåçîïàñíûõ ðåàêòèâîâ.
Îáëàñòè ïðèìåíåíèÿ ôåðìåíòàòèâíîãî àíàëèçà íà ïðàêòèêå ìíîãîîáðàçíû. Ýòî è ïðîèçâîäñòâåííûé êîíòðîëü, è êîíòðîëü êà÷åñòâà ãîòîâîé ïðîäóêöèè, à òàêæå êîíòðîëü ñûðüÿ, àíàëèç ñîñòàâà ïèùåâîãî ïðîäóêòà ñ öåëüþ óñòàíîâëåíèÿ èõ ñâîéñòâ è ñîîòâåòñòâèÿ çàêîíîäàòåëüíûì íîðìàì, îöåíêà ãèãèåíè÷åñêîãî ñòàòóñà, èäåíòèôèêàöèÿ è óñòàíîâëåíèå ôàëüñèôèêàöèè.
Îïðåäåëåíèå ïåðâè÷íîé ñòðóêòóðû áåëêîâ ñâîäèòñÿ ê âûÿñíåíèþ ïîðÿäêà ðàñïîëîæåíèÿ àìèíîêèñëîò â ïîëèïåïòèäíîé öåïî÷êå. Ýòó çàäà÷ó ðåøàþò ñ ïîìîùüþ ìåòîäà ñåêâåíèðîâàíèÿ (îò àíãë. sequence ïîñëåäîâàòåëüíîñòü).
Ñîáñòâåííî ñåêâåíèðîâàíèå íà åãî ñåãîäíÿøíåì óðîâíå ïîçâîëÿåò îïðåäåëèòü àìèíîêèñëîòíóþ ïîñëåäîâàòåëüíîñòü â ïîëèïåïòèäàõ, ðàçìåð êîòîðûõ íå ïðåâûøàåò íåñêîëüêî äåñÿòêîâ àìèíîêèñëîòíûõ îñòàòêîâ.  òî æå âðåìÿ èññëåäóåìûå ïîëèïåïòèäíûå ôðàãìåíòû çíà÷èòåëüíî êîðî÷å òåõ ïðèðîäíûõ áåëêîâ, ñ êîòîðûìè ïðèõîäèòñÿ èìåòü äåëî. Ïîýòîìó íåîáõîäèìî ïðåäâàðèòåëüíîå ðàçðåçàíèå èñõîäíîãî ïîëèïåïòèäà íà êîðîòêèå ôðàãìåíòû. Ïîñëå ñåêâåíèðîâàíèÿ ïîëó÷åííûõ ôðàãìåíòîâ èõ íåîáõîäèìî ñíîâà ñøèòü â ïåðâîíà÷àëüíîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè.
Òàêèì îáðàçîì, îïðåäåëåíèå ïåðâè÷íîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè áåëêà ñâîäèòñÿ ê ñëåäóþùèì îñíîâíûì ýòàïàì:
1) Ðàñùåïëåíèå áåëêà íà íåñêîëüêî ôðàãìåíòîâ äëèíîé, äîñòóïíîé äëÿ ñåêâåíèðîâàíèÿ.
2) Ñåêâåíèðîâàíèå êàæäîãî èç ïîëó÷åííûõ ôðàãìåíòîâ.
3) Ñáîðêà ïîëíîé ñòðóêòóðû áåëêà èç óñòàíîâëåííûõ ñòðóêòóð åãî ôðàãìåíòîâ.
Äëÿ ñïåöèôè÷åñêîãî ðàñùåïëåíèÿ áåëêîâ ïî îïðåäåëåííûì òî÷êàì ïðèìåíÿþòñÿ êàê ôåðìåíòàòèâíûå, òàê è õèìè÷åñêèå ìåòîäû. Èç ôåðìåíòîâ, êàòàëèçèðóþùèõ ãèäðîëèç áåëêîâ ïî îïðåäåëåííûì òî÷êàì, íàèáîëåå øèðîêî èñïîëüçóþò òðèïñèí è õèìîòðèïñèí. Òðèïñèí êàòàëèçèðóåò ãèäðîëèç ïåïòèäíûõ ñâÿçåé, ðàñïîëîæåííûõ ïîñëå îñòàòêîâ ëèçèíà è àðãèíèíà. Õèìîòðèïñèí ïðåèìóùåñòâåííî ðàñùåïëÿåò áåëêè ïîñëå îñòàòêîâ àðîìàòè÷åñêèõ àìèíîêèñëîò — ôåíèëàëàíèíà, òèðîçèíà è òðèïòîôàíà. Ïðè íåîáõîäèìîñòè ñïåöèôè÷íîñòü òðèïñèíà ìîæåò áûòü ïîâûøåíà èëè èçìåíåíà. Íàïðèìåð, îáðàáîòêà öèòðàêîíîâûì àíãèäðèäîì èññëåäóåìîãî áåëêà ïðèâîäèò ê àöèëèðîâàíèþ îñòàòêîâ ëèçèíà.  òàêîì ìîäèôèöèðîâàííîì áåëêå ðàñùåïëåíèå áóäåò ïðîõîäèòü òîëüêî ïî îñòàòêàì àðãèíèíà. Íàèáîëåå ñïåöèôè÷íûìè è ïåðñïåêòèâíûìè ìåòîäàìè îïðåäåëåíèÿ ñàõàðîâ ñ÷èòàþòñÿ ìåòîäû, îñíîâàííûå íà èñïîëüçîâàíèè ÷èñòûõ ôåðìåíòîâ. Òàê, ãëþêîçó â áèîëîãè÷åñêèõ æèäêîñòÿõ îïðåäåëÿþò ñ ïîìîùüþ ôåðìåíòà ãëþêîçîîêñèäàçû. Ýòîò ôåðìåíò îêèñëÿåò ãëþêîçó äî ãëþêîíîâîé êèñëîòû, ïðè ýòîì â ðåàêöèè îáðàçóåòñÿ ïåðåêèñü âîäîðîäà; åå ðàñùåïëÿþò ôåðìåíòîì ïåðîêñèäàçîé, è îáðàçîâàâøèéñÿ â ðåàêöèè àòîìàðíûé êèñëîðîä îêèñëÿåò êàêîé-ëèáî êðàñèòåëü äî îêðàøåííîé ôîðìû. Èíòåíñèâíîñòü îêðàñêè ïðîïîðöèîíàëüíà ñîäåðæàíèþ â ïðîáå ãëþêîçû. Ìåòîä óíèôèöèðîâàí è øèðîêî ðàñïðîñòðàíåí âî ìíîãèõ êëèíèêî-äèàãíîñòè÷åñêèõ ëàáîðàòîðèÿõ. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ãëþêîçû áûëè ðàçðàáîòàíû òàêæå ìåòîäû ñ èñïîëüçîâàíèåì ôåðìåíòà ãåêñîêèíàçû, êîòîðàÿ ïðè ó÷àñòèè àäåíîçèíòðèôîñôàòà ïðåâðàùàåò ãëþêîçó â ãëþêîçî-6-ôîñôàò; â ðåàêöèè îáðàçóåòñÿ òàêæå àäåíîçèíäèôîñôàò. Äàëåå îïðåäåëÿþò ãëþêîçî-6-ôîñôàò ñ ïîìîùüþ ãëþêîçî-6-ôîñôàòäåãèäðîãåíàçû èëè ñîäåðæàíèå àäåíîçèíäèôîñôàòà ñ ïîìîùüþ ïèðóâàòêèíàçû è ëàêòàòäåãèäðîãåíàçû. Ãåêñîêèíàçíûå ìåòîäû òî÷íû è ñïåöèôè÷íû, íî èñïîëüçóþòñÿ ðåäêî èç-çà äåôèöèòà è âûñîêîé ñòîèìîñòè ÷èñòûõ ôåðìåíòîâ. Ñïåöèôè÷åñêîå îïðåäåëåíèå ãàëàêòîçû â êðîâè áîëüíûõ ñ ãàëàêòîçåìèåé ïðîâîäèëîñü ñ ïîìîùüþ ãàëàêòîçîîêñèäàçû — ôåðìåíòà ïî ñâîåìó äåéñòâèþ áëèçêîãî ê ãëþêîçîîêñèäàçå.
Ïðîáëåìà èäåíòèôèêàöèè ñàõàðîâ â áèîëîãè÷åñêèõ æèäêîñòÿõ âîçíèêëà âñëåäñòâèå íåîáõîäèìîñòè äèàãíîñòèðîâàòü ðàçëè÷íûå ìåëèòóðèè, áîëåçíè íàêîïëåíèÿ, à òàêæå ñ öåëüþ óñòàíîâëåíèÿ ñòðîåíèÿ îëèãîñàõàðèäîâ. Ïåðâûå ìåòîäû èäåíòèôèêàöèè áûëè êà÷åñòâåííûìè ïðîáàìè íà îïðåäåëåííûå âèäû ñàõàðîâ. Îíè îñíîâûâàëèñü íà îáðàçîâàíèè ðàçëè÷íûõ âèäîâ îçàçîíîâûõ è ãèäðàçîíîâûõ êðèñòàëëîâ ìîíîñàõàðèäîâ, íà ñáðàæèâàíèè ñàõàðîâ ðàçëè÷íûìè ìèêðîîðãàíèçìàìè, íà ðàçëè÷íîé ñïîñîáíîñòè ìîíîñàõàðèäîâ îáðàçîâûâàòü ôóðôóðîëû. Ïåíòîçû â ìî÷å îáíàðóæèâàëè ïðîáàìè ñ ôëîðîãëþöèíîì, îðöèíîì, áåíçèäèíîì è äð.; ôðóêòîçó — ðåçîðöèíîâûì, òèîáàðáèòóðîâûì è äðóãèìè ìåòîäàìè; ãàëàêòîçó è ëàêòîçó — ïî îáðàçîâàíèþ áåëîé ñëèçåâîé êèñëîòû â ïðèñóòñòâèè àçîòíîé êèñëîòû; äåçîêñèñàõàðà (ôóêîçó, äåçîêñèðèáîçó è äð.) — ìåòîäàìè Äèøå ïî äèôåíèëàìèíîâîé ðåàêöèè â êèñëîé ñðåäå; ñèàëîâûå êèñëîòû ïîñëå èõ ãèäðîëèòè÷åñêîãî îòùåïëåíèÿ îò ãëèêîïðîòåèäîâ îïðåäåëÿëè ïî ðåàêöèè Ãåññà ñ ñåðíîé è óêñóñíîé êèñëîòàìè èëè ïî ðåàêöèè ñ òèîáàðáèòóðîâîé êèñëîòîé; ñàõàðîçó — ïî êèñëîòíîìó èëè ôåðìåíòàòèâíîìó ãèäðîëèçó è îáðàçîâàíèþ ãëþêîçû è ôðóêòîçû. Âñå ôåðìåíòàòèâíûå ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ ñàõàðîâ ÿâëÿþòñÿ òàêæå è ìåòîäàìè èõ èäåíòèôèêàöèè.
 îñíîâå ìåòîäà ôåðìåíòàòèâíîãî îïðåäåëåíèÿ êîíöåíòðàöèè ëèïèäîâ ëåæàò ñïåöèôè÷åñêèå âçàèìîäåéñòâèÿ äâóõ òèïîâ ôåðìåíòîâ — ýñòåðàçû è îêñèäàçû — ñî ñâîèì ñóáñòðàòîì, òî åñòü âåùåñòâîì, îòíîñÿùèìñÿ ê ñïåöèôè÷åñêîìó êëàññó ëèïèäîâ.  ñëó÷àå, íàïðèìåð, ìåòîäà îïðåäåëåíèÿ êîíöåíòðàöèè õîëåñòåðèíà — ýòî õîëåñòåðîë-ýñòåðàçà, ãèäðîëèçóþùàÿ ñëîæíûå ýôèðû õîëåñòåðèíà, è õîëåñòåðîë-îêñèäàçà, îêèñëÿþùàÿ îáðàçîâàâøèéñÿ â ïðåäûäóùåé ðåàêöèè õîëåñòåðèí ñ îáðàçîâàíèåì â êà÷åñòâå îäíîãî èç ïðîäóêòîâ ðåàêöèè ïåðîêñèä âîäîðîäà.
Êîëè÷åñòâî îáðàçîâàâøåãîñÿ ïðè ðàáîòå ñèñòåìû ôåðìåíòàòèâíîãî îïðåäåëåíèÿ êîíöåíòðàöèè ëèïèäîâ ïåðîêñèäà âîäîðîäà (ïåðåêèñü) ïðîïîðöèîíàëüíî ñîäåðæàíèþ îïðåäåëÿåìîãî ëèïèäíîãî êîìïàíåíòà êðîâè (õîëåñòåðèíà, ôîñôîëèïèäà èëè òðèãëèöåðèäà). Êîíå÷íîé ðåàêöèåé òåñò-ñèñòåìû òàêîãî ðîäà ÿâëÿåòñÿ âçàèìîäåéñòâèå ïåðîêñèäà âîäîðîäà ñ 4-àìèíîôåíàçîíîì è ôåíîëîì ñ îáðàçîâàíèåì 4-(p-áåíîçîõèíîí-ìîíîèìèíî)-ôåíàçîíà, ýôôåêòèâíî ïîãëàùàþùåãî ñâåò ñ äëèíîé âîëíû 500 íì. Ôîòîìåòðè÷åñêàÿ àáñîðáöèÿ, èçìåðåíàÿ ïðè 500 íì, îòðàæàåò ñîäåðæàíèå õîëåñòåðèíà, ôîñôîëèïèäîâ èëè òðèãëèöåðèäîâ êðîâè (â çàâèñèìîñòè îò èñïîëüçîâàíîé òåñò-ñèñòåìû) è ëåãêî ìîæåò áûòü ïåðåâåäåíà â çíà÷åíèÿ êîíöåíòðàöèè èëè ìîëÿðíîé êîíöåíòðàöèè.
Ñïèñîê èñïîëüçóåìîé ëèòåðàòóðû
1. Íå÷àåâ À.Ï., Òðàóáåíáåðã Ñâåòëàíà Åâãåíüåâíà, Êî÷åòêîâà Àëëà Àëåêñååâíà, Íå÷àåâ À.Ï. Ïèùåâàÿ õèìèÿ, 2003
2. Ëèò.: Äîëìàíîâà È. Ô., Óãàðîâà Í.Í., «Æ. àíàëèò. õèìèè», 1980, ò. 35, â. 8, ñ. 1597-1639;
3. https://www.xumuk.ru
Ðàçìåùåíî íà Allbest.ru
…