Клостридия в каких продуктах

Клостридия в каких продуктах thumbnail

Пищевые отравления (пищевые интоксикации), вызванные clostridium perfringens

Чем клостридии опасны для человека? Бактерии рода клостридий (Clostridium) относятся к числу микроорганизмов, имеющих всесветное распространение. Они часто вызывают тяжелейшие заболевания, которые могут заканчиваться смертельным исходом.

При заражении Clostridium botulinum (клостридией, вызывающей ботулизм) умирает 15-30% больных. При возникновении столбняка, вызываемого Clostridium tetani, особенно у людей, не привитых против этой инфекции, смертельный исход болезни также неизбежен во многих случаях.

Наконец, Clostridium perfringens (клостридия перфрингенс) при заражении человека способна вызывать, наряду с пищевым отравлением, еще и так называемый некротический энтерит, сопровождающийся омертвением тканей тонкого кишечника и смертью больных более, чем в 30% случаев.

Учитывая это, необходимо четко представлять себе, каким образом происходит заражение клостридией перфрингенс и какие меры безопасности необходимо соблюдать, чтобы обеспечить надежную защиту от этой опасной болезни.
strong>Возбудитель. Клостридия перфрингенс, как и многие другие клостридии, относится к числутак называемых анаэробных микроорганизмов[в греч. частица ан обозначает отрицание; аэро – воздух], которыене способны к росту в присутствии свободного кислорода, но прекрасно себя чувствуют при его практически полном отсутствии, например, в толще (внутри) того или иного, чаще мясного пищевого продукта.

Еще одним очень важным защитным свойством возбудителя является его способность превращаться в спорообразную форму. Споры обладают высокой устойчивостью к действию самых неблагоприятных факторов, включая тепло, холод, высыхание, ультрафиолет, радиацию, кислоты и щелочи, различные средства дезинфекции и др. Они сохраняют жизнеспособность даже в условиях замораживания в домашних холодильниках.

Как только создаются более или менее благоприятные условия для существования, споры прорастают, превращаются в обычную, вегетативную форму этих бактерий, которая начинает активно размножаться при 5-600С в пищевых продуктах, и выделять очень сильный яд (термостабильный энтеротоксин), вызывающий тяжелое заболевание.

Где живет возбудитель? Да, фактически, везде. Он особенно часто встречается в почве. Выделяются десятки тысяч бактерий в 1 г этого субстрата. Постоянно обнаруживается в сточных водах, различных отложениях почвы, а также в пищеварительном тракте здоровых людей и различных диких и домашних животных. Неоднократно выделялся из сырого мяса домашних животных и птицы.

Из почвы возбудитель смывается дождевыми потоками и талыми водами в различные водоемы и сохраняется в придонных осадках. С пылью поднимается в воздух и широко разносится ветром на прилегающие и отдаленные территории. Мы окружены этим коварным врагом буквально со всех сторон.

А как часто возникают заболевания? Достаточно часто. В США, например, они занимают третье место по частоте возникновения после сальмонеллезных и стафилококковых пищевых отравлений.

Согласно экспертной оценке Центра заразных болезней (США, Атланта), число заболеваний в этой стране на сегодняшний день ежегодно составляет не менее 250 тысяч случаев. Несомненно, и в нашей стране болезнь широко распространена.

При употреблении каких пищевых продуктов происходит заражение? Возбудитель активно размножается в пищевых продуктах животного происхождения с большим содержанием протеинов (белка). Именно его особая «любовь» к белковой пище определяет тот факт, что заражение людей часто происходит при употреблении зараженного этим возбудителем тушеного мяса (говядины), мясных продуктов и различных мясных блюд, в том числе пирогов с мясом, а также различных мясных подливок (соусов), приготовленных с использованием говядины, а также мяса индюков и цыплят.

Реже заражение возникает при употреблении продуктов из мяса домашней птицы, свинины, телятины, рыбы, креветок, крабов, бобов, картофельного салата, макарон и сыра, хотя и они часто загрязнены клостридиями.

Как происходит заражение? Укажем, что заражения человека от человека не происходит. Тем не менее, механизм заражения людей весьма простой. Болезнь возникает в результате употребления пищи, загрязненной землей или выделениями (фекалиями) животных и людей, в которых содержится возбудитель.

Однако, этого недостаточно, чтобы вызвать болезнь, особенно у здорового человека. Возбудителю необходимо не только попасть в пищевой продукт, но еще и размножиться в нем в большом количестве для достижения заражающей человека дозы (>105 микробных клеток в 1 г пищевого продукта), но и выделить яд (энтеротоксин), вызывающий болезнь.

Проникновение нашей вездесущей клостридии практически в любой пищевой продукт не представляет больших трудностей. Сложнее сохраниться в пищевом продукте в процессе его кулинарной обработки и приготовления с использованием высоких температур. Но и здесь природа позаботилась о сохранении этого возбудителя.

Как только возникают неблагоприятные, опасные для его существования условия (становится слишком жарко), он незамедлительно превращается в спорообразное состояние, а споры очень устойчивы и легко сохраняются в толще пищи, особенно когда она готовится в больших объемах, а мясо, например, большими кусками, которые проварить сложно.

Ну а далее после приготовления пищи наступает эпидемическая кульминация. В процесса ее охлаждения и затем хранения особенно при комнатной температуре дремлющие до поры до времени споры активизируются и переходят в вегетативную форму, способную размножаться в зоне «повышенного температурного риска» (в температурном диапазоне от 5 до 600С и особенно активно при температуре 20-500С), выделяя при этом мощный, болезнетворный энтеротоксин, также устойчивый к действию высоких температур.

Размножению клостридии, находящейся в толще пищевого продукта, наряду с благоприятной температурой, способствует практическое отсутствие свободного кислорода, который анаэробы плохо переносят. Повторной термической обработки готового продукта (разогревания) бывает, как правило, недостаточно для его обеззараживания, поскольку в большинстве случаев не достигается температура (750С), необходимая для полного уничтожения клостридий.

Читайте также:  Какими продуктами повысить содержание белка

Наконец, зараженная пища съедена и болезнь не заставляет себя долго ждать.

Инкубационный период. Время от момента употребления зараженной пищи до появления первых признаков болезни исчисляется всего лишь 8-22 часами, однако обычно оно составляет 10-12 часов.

Клиническая картина болезни характеризуется признаками гастроэнтерита (воспаления слизистой оболочки желудка и тонкой кишки).Отравления, вызванные токсинами клостридий протекают значительно тяжелее, чем, например, стафилококковые пищевые отравления. Болезнь начинается с болей в животе, преимущественно в пупочной области, нарастает общая слабость, тем не менее температура не повышается. Стул учащается до 20 раз в сутки, бывает обильным, водянистым, иногда принимает вид рисового отвара.

Многократный, жидкий стул и рвота могут приводить к избыточной потере жидкости и электролитов и развитию выраженного обезвоживания организма (дегидратации). Появляются судороги, характерное заостренное лицо, морщинистая кожа кистей, не расправляющиеся складки кожи на теле больного.

В целом, однако, болезнь чаще протекает сравнительно легко и заканчивается уже в течение суток. В связи с этим, многие из заболевших предполагают, что они перенесли всего лишь так называемый 24-часовой грипп.

В то же время может развиться крайне тяжело протекающий некротический энтерит, сопровождающийся сильными болями в животе, тошнотой, рвотой, жидким стулом, иногда с примесью крови. Болезнь часто заканчивается смертельным исходом из-за некроза кишечника.

Где чаще возникают вспышки? Это, прежде всего, учреждения и объекты с организованным, общественным питанием, особенно в тех случаях, когда оно предназначается для большого числа людей и пища, соответственно, готовится в больших объемах, что может приводить к недостаточной ее термической обработке, нарушению условий хранения и сроков реализации.

Наиболее часто возникновению вспышек способствовало длительное время, проходившее от момента приготовления пищи до ее употребления при неправильном хранении в этот период.

К числу объектов повышенного эпидемического риска относятся больницы, школы, школы-интернаты, детские дошкольные учреждения, тюрьмы, детские дома, дома для престарелых и инвалидов, трудовые лагеря и др.

Особого внимания в этом плане заслуживают также различные объекты (крупные универсамы и универмаги, а также новостройки с привлечением гастарбайтеров и др.) с привозным, организованным питанием, доставка которого и последующая реализация может занимать много времени.

Некоторые вспышки в США. В этой стране клостридия перфрингенс является часто встречающейся причиной пищевых отравлений, особенно при употреблении мяса (говядины) и различных мясных блюд. Две подобные вспышки возникли в штатах Огайо и Виржиния после банкетов по поводу дня Святого Патрика.

Крупная вспышка была зарегистрирована среди работников одной из фабрик в штате Коннектикут. Заболели 44% из 1362 сотрудников. Заражение произошло при употреблении инфицированной мясной подливки, которая была приготовлена за 12–24 часа до ее подачи на стол. Подливка неправильно охлаждалась (при комнатной температуре) и затем повторно разогревалась незадолго до ее употребления. Была установлена обратная связь между продолжительностью повторного разогревания готовой подливки и частотой заболеваний среди употреблявших ее лиц. Чем дольше разогревалась подливка, тем меньше возникало пищевых отравлений.

Не столь крупная вспышка возникла среди работников одного учреждения, пользующихся услугами столовой. Заболели 77 человек. Фактором передачи возбудителя послужил ростбиф (жареное мясо). В большинстве случаев инкубационный период составлял 8–16 часов. Диагноз был подтвержден выделением возбудителя из стула 24 больных.

Повторная вспышка той же инфекции появилась в этом же учреждении спустя 8 дней. На этот раз заражение происходило при употреблении ветчины, которая после приготовления слишком долго охлаждалась при комнатной температуре, и затем подвергалась недостаточной термической обработке при повторном разогревании.

Диагностика болезни обеспечивается обнаружением энтеротоксина клостридий в стуле больных. Кроме того, диагноз может быть верифицирован выделением большого числа микробных клеток этого возбудителя из подозреваемого в качестве фактора передачи пищевого продукта (105 и более в 1 г продукта) и стула больных (106 и более в 1 г) в дополнение к клиническим данным и результатам эпидемиологического расследования вспышки.

Профилактика в своей первооснове зиждется на двух принципах. Во-первых, по возможности, на недопущении попадания (проникновения) клостридий перфрингенс в пищевые продукты. Это, однако, весьма затруднительно, учитывая их чрезвычайно широкое, фактически повсеместное распространение в окружающей среде как в обычной, вегетативной форме, так и в виде очень устойчивых спор. Именно поэтому наиболее важной, основополагающей и, главное, реальной повседневной задачей остается предупреждение размножения возбудителя, находящегося в пищевом продукте.

Чтобы добиться успеха в борьбе с этой, как считают «пищевики», одной из самых проблемных инфекций, a’priori следует исходить из предположения, что любая «мясная» пища, особенно та, которая готовится в больших объемах в системе общественного питания, инфицирована клостридиями. Часто, действительно, так и бывает. Учитывая это, необходимо сделать все возможное, чтобы не позволить возбудителю размножиться и вызвать отравление людей болезнетворным энтеротоксином.

Как же этого добиться? Превентивные меры, которые должны быть приняты для предупреждения отравлений включают:

  1. строгое соблюдение «пищевиками» правил личной гигиены и их достаточная, профессиональная подготовка по вопросам безопасного приготовления пищевых продуктов. Они должны четко представлять эпидемические риски, связанные с приготовлением больших объемов пищи, особенно мясных блюд;
  2. обеспечение высоких температур (>90-950C) при приготовлении пищи, особенно тщательно должны провариваться большие куски мяса;
  3. раздачу пищи в горячем состоянии (при t > 600C) непосредственно после ее приготовления;
  4. хранение свежеприготовленной горячей пищи при t > 600C (предпочтительно при 700С), например, на мармитных печах, если ее раздача потребителям по какой-то причине задерживается;
  5. быстрое охлаждение готовой пищи путем ее разделения на небольшие порции и помещения в не глубокие контейнеры (глубиной менее 10 см);
  6. хранение холодной пищи при 40C и менее для недопущения размножения возбудителя и выделения токсина в пищевом продукте;
  7. повторное разогревание пищи по меньшей мере при 750С или при температуре пара, так как кратковременный подогрев на плоской сковородке недостаточен для разрушения термостабильного энтнротоксина;
  8. предупреждение перекрестной контаминации готовой пищи сырыми продуктами путем раздельного их хранения или проведения санитарной обработки столов после приготовления отдельных видов пищевых блюд;
  9. тщательное мытье фруктов и овощей водой, отвечающей стандартам питьевой воды, для недопущения попадания клостридий на другие пищевые продукты.
Читайте также:  Как определить какие продукты повышают сахар

Общепринятой и рациональной остается рекомендация подавать горячую пищу в горячем состоянии (при t>600C), а холодную – в холодном (при 40С и менее). Очень важным в профилактическом отношении является быстрое охлаждение готовой пищи (для скорейшего выхода из «зоны температурного риска»). Готовая пища должна охлаждаться в течение 2 часов с 600С до 200С (зона максимального риска) и в течение 6 часов с 600С до 40С (зона риска). Следует также помнить, что при комнатной температуре охлажденная готовая пища может находиться не более 2 часов.

По материалам журнала «СЭС. Информация по тел. 508-3383.

Источник

Информация для заказа:

— DRCM broth — Дифференциальный улучшенный клостридиальный бульон, Кат.№ 111699
Fluid thioglycolate medium (Тиогликолевая среда), Кат.№ 108191
RCM medium (Улучшенный клостридиальный бульон), Кат.№ 105411
RCA agar (Улучшенный клостридиальный агар), Кат.№ 105410
TSN agar — TSN агар для определения сульфитредуцирующих клостридий, Кат.№ 105264
TSC agar для определения сульфитредуцирующих клостридий, Кат.№ 111972
SPS-agar (Сульфит-полимиксин-сульфадиазин агар), Кат.№ 110235
DCA-agar (Дифференциальный клостридиальный агар), Кат.№ 110259
Sulfite iron agar (Железо-сульфитный агар), Кат.№ 110864


SPS agar (Clostridium perfringens)

SPS agar (Clostridium perfringens)

Clostridium perfringens
Clostridium perfringens – это анаэробные, грамположительные, спорообразующие палочки. Широко распространены в окружающей среде, часто обнаруживаются в кишечнике человека, многих домашних и диких животных. Споры сохраняются в почве, донных осадках в районах, подверженных фекальному загрязнению. Споры термоустойчивы и сохраняют жизнеспособность при обычном приготовлении пищи. Некоторые штаммы выдерживают кипячение (100°C) в течение 1 часа. Большинство случаев бактериального отравления связаны с нарушением температурного режима при приготовлении пищи.  Небольшая часть бактерий  часто присутствуют в готовой пище. Размножение бактерий при хранении готовых продуктов может создавать угрозу пищевого отравления. Обычно бактерии хорошо растут на продуктах с высоким содержанием крахмала или белка, таких как бобовые, мясные продукты, густые супы и соусы.

Распространенная форма при бактериальном отравлении C. perfringens характеризуется интенсивными спазмами желудка и диареей. Симптомы проявляются спустя 8-22 ч после употребления продуктов, содержащих большое количество бактерий C. perfringens, продуцирующие токсины, вызывающие пищевые отравления. Отдельные симптомы болезни могут сохраняться у больных на протяжении 1-2 недель. Отмечено несколько смертельных исходов из-за обезвоживания организма и других осложнений. В редких случаях инфицирование также приводит к некротическому энтериту. Смертность от некротического энтерита в результате отравления вызвана некрозом кишечника. Инфекционная доза, как правило, превышает 108 вегетативных клеток. Токсинообразование связано с процессом споруляции бактерий в желудочно-кишечном тракте. 

Патогенность, масштабы заболевания
Пищевые инфекции, вызванные Clostridium perfringens, приобретают все большую  значимость. Clostridium perfringens широко распространен в окружающей среде. Бактерии выделяют из почвы (содержание клеток достигает 104/г), водоисточников, осадков сточных вод. Обнаружение Clostridium perfringens свидетельствует о некогда имевшем место фекальном загрязнении. Бактерии являются постоянными обитателями кишечного тракта человека и домашних животных. В содержимом толстой кишки насчитывается до 1010/г различных видов клостридий. Вегетативные клетки неподвижны, лишены жгутиков, in vivo образуют капсулу. Вместе с почвой и фекальными выделениями сырье, загрязненное клостридиями, в процессе производства инфицирует готовые животноводческие и растениеводческие продукты. У людей и животных бактерии вызывают энтеральные клостридиозы (гастроэнтериты, некротические энтериты, анаэробную энтеротоксемию) и анаэробные раневые инфекции. У людей заболевания возникают после употребления в пищу загрязненных продуктов преимущественно животного происхождения и не соблюдении правил личной гигиены. В тонком кишечнике бактерии быстро размножаются и выделяют токсины, вызывающие геморрагически-некротическое воспаление и общую интоксикацию организма. Вызываемая С. perfringens анаэробная энтеротоксемия – массовое заболевание молодняка домашних животных, причиняющее, в частности, значительный урон промышленному птицеводству.


TSC agar (Clostridium perfringens)

TSC agar (Clostridium perfringens)

Морфология бактерий и колоний
С. perfringens (семейства Bacillaceae) имеют крупные (0,6-1 х 1-1,5 мкм) вегетативные клетки в форме коротких палочек с обрубленными под прямым углом концами. Как правило, бактерии грамположительные (в старых культурах могут быть грамотрицательными), лишены жгутиков и неподвижны, in vivo образуют капсулу. Капсулы наиболее выражены у вирулентных штаммов. Форма клетки может варьировать в зависимости от состава среды. Споры крупные (диаметр больше диаметра бактерии), округлые или овальные, расположены центрально или субтерминально. На плотных средах C. perfringens  образует S- и R-колонии. S-колонии круглые, куполообразные, с гладкими ровными краями, в начале роста прозрачные, напоминающие капли росы, позднее – мутные, серовато-белые. R-колонии неправильной формы, бугристые, с шероховатыми неровными краями, в глубине агара напоминают комки ваты. У некоторых штаммов образуются слизистые М-колонии.

Читайте также:  Какие животные нам дают продукты

Физиолого-биохимические особенности
C. perfringens – факультативные анаэробы, хемоорганотрофы. Их колонии на плотных средах окружены зоной гемолиза, который может быть либо полным, либо частичным. На жидких и полужидких средах, особенно содержащих глюкозу, рост колоний происходит очень бурно, с выделением Н2 и СО2. C. perfringens  растет в анаэробных условиях на мясных питательных средах с добавлением сахаров, оптимум рН – 7,2-7,4, рост возможен и в интервале рН 5-8,5. Спорообразование обычно происходит в почве и кишечнике. Споры можно получить in vitro на щелочных средах, богатых белком и не содержащих сбраживаемых углеводов. Спорообразование стимулируется прогреванием при 75 °C в течение 10-15 мин. Серовар А относительно толерантен к краткосрочным кислородным воздействиям. При варке мяса некоторые штаммы погибают за несколько минут, тогда как другие (серовары А и С) выживают при  кипячении и даже автоклавировании в течение 1-6 ч. Термоустойчивость спор серотипов B и D относительно невысока (погибают при кипячении в течение 15-30 мин). Споры, находящиеся в жировой ткани, сохраняют жизнеспособность в течение длительного времени. Споры C. perfringens  отличаются высокой устойчивостью к химическим и физическим воздействиям. Протеолитическая активность слабая, оксидазо- и каталазонегативны, интенсивно створаживают молоко.  Расщепляют глюкозу и другие углеводы с образованием кислоты. Только бактерии C. perfringens  способны восстанавливать нитраты, расщеплять лактозу и продуцировать лецитиназу (α-токсин). Серовары (A–F) различают по антигенным свойствам – способности образовывать различные экзотоксины.

Источники и факторы передачи инфекции
Инфицирование клостридиозом происходит фекально-оральным и контактным способами. Споры С. perfringens способны длительное время сохраняться в окружающей среде, в частности, они вегетируют в почве, богатой гумусом. В почве и испражнениях теплокровных наиболее часто обнаруживается бактерии серотипа А. Из почвы эти бактерии с пылью попадают в приземную атмосферу и открытые водоисточники. При газовой гангрене бактерии, а чаще их споры могут быть занесены в раны из внешней среды, а также с кожи или из желудочно-кишечного тракта больного. Место постоянного обитания серотипа С пока не установлено. Эти бактерии вызывают пищевые токсикоинфекции у человека, их выделяют из мясных и рыбных консервов.


Инкубация в анаэробных условиях (Anaerobic Jar + газ-пак Anaerocult A)

Инкубация в анаэробных условиях (Anaerobic Jar + газ-пак Anaerocult A)

Патогенез
У человека С. perfringens вызывает три типа поражений – пищевые токсикоинфекции (энтеротоксемию), некротический энтерит и газовую гангрену (анаэробный сепсис). Для человека патогенными являются серовары А (преимущественно), а также C и D, для животных – B, C, D, E. Токсины и ферменты – основные факторы патогенеза. Мишенью их действия являются клеточные мембраны, что приводит к нарушению клеточной проницаемости. Следствием является отек пораженной ткани, активация эндогенных протеаз и автолиз тканей. Серовары А и С продуцируют энтеротоксин – термолабильный протеин, вызывающий пищевые токсикоинфекции средней тяжести. Заболевание проявляется в острой форме, сопровождается общей слабостью, головокружением, но температура повышается редко.

Некротический энтерит (возбудитель – штаммы серовара С) протекает в более тяжелой форме. При острых формах заболевание может закончиться смертью пациента в течение 12-24 ч.  

Газовая гангрена развивается при попадании клеток С. perfringens на раневые поверхности, где в условиях пониженного содержания кислорода бактерии активно размножаются. Возбудитель продуцирует, как минимум, 12 токсинов и ферментов – факторов патогенеза. Поражение характеризуется некрозом тканей и образованием газа с гнилостным запахом. Обильное образование газа свидетельствует о преимущественно анаэробных раневых инфекциях. Их возбудитель — палочка газовой гангрены. Характерная особенность гистологических препаратов, из очагов поражения – практически полное отсутствие фагоцитов. 


Fluorocult TSC agar (Cl. perfringens)

Fluorocult TSC agar (Cl. perfringens)

Методы обнаружения
Количественный учет клостридий предусмотрен при исследовании потенциальных источников пищевых отравлений – пищевых продуктов  (мясных, молочных, рыбных, мяса птицы), а также почвы, воды открытых водоемов и лечебных грязей. Выявление спор С. рerfringens рекомендовано при оценке эффективности технологических процессов очистки воды, поскольку эти споры весьма устойчивы к обеззараживанию хлором и другими дезсредствами.

Классический метод
Бактерии С. perfringens при росте в селективных (железо-сульфитных) средах  образуют типичные, окрашенные в черный цвет колонии (трансформация сульфита до сульфида). Данный признак используется для выявления бактерии. Сущность метода заключается в посеве в чашки Петри определенного количества исследуемого образца (или его разведения). Затем добавляют селективную среду  и посев сверху заливают слоем той же среды. Посев инкубируют в анаэробных условиях при 370С в течение 20 (±2) ч, после чего проводят подсчет типичных колоний. Затем подтверждают ряд типичных колоний и определяют количество колоний С. perfringens (КОЕ на 1 г или 1 см3  образца).  

Хромогенный агар позволяет сократить время исследования и идентифицировать колонии на этапе первичного посева
TSC agar с хромогенной добавкой для определения сульфитредуцирующих клостридий, Кат.№ 111972

Нормативная документация
— ГОСТ Р 53400-2009  (ИСО 7937:2004) Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Метод подсчета колоний Clostridium perfringens.


Источник